活性多肽分子可以被熒光基團(tuán)標(biāo)記,應(yīng)用于熒光成像領(lǐng)域。熒光基團(tuán)分子具有以下功能:其吸收特定波長能量的光子后,立即在另一較長波長區(qū)域釋放出具有一定能量的光子。對于熒光基團(tuán)染色能力和效率,有一系列參考準(zhǔn)則(主要考察其吸收光子和釋放光子,以及重復(fù)上述過程)。在這些標(biāo)準(zhǔn)中,摩爾消光系數(shù)ε和量子效率QY是重要的兩個衡量熒光強(qiáng)度的參數(shù),它們與光子吸收和熒光發(fā)射密切相關(guān)。通常來說,摩爾消光系數(shù)ε在5000~250000 cm-1 M-1范圍之間,量子效率QY在0.05-1.0之間的熒光素將滿足分子作為熒光基團(tuán)的基本要求。
如何選擇合適的熒光多肽取決于您的實(shí)驗需求。藥理學(xué)實(shí)驗研究基本分為體內(nèi)研究和體外研究兩大類。對于體內(nèi)研究,一般選擇發(fā)射波長在650-900nm的熒光基團(tuán),例如:ICG、Cy5.5和Nile Blue。這是因為這類基團(tuán)所發(fā)出的熒光具有較好的組織穿透能力,受背景干擾較小(水、血紅蛋白和脫氧血紅蛋白一般都會產(chǎn)生背景干擾吸收,其區(qū)域在560nm左右)。對于體外研究,發(fā)射波長在400到600nm的熒光基團(tuán)為常用,例如:AMC、FITC和TAMRA。
熒光多肽在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用是很廣泛的。例如:用Cy5.5標(biāo)記的目標(biāo)多肽研究對c-Met受體的綁定作用。有人設(shè)計含有KSLSRHDHIHHH序列的cMBP,其C端 為GGGSC, C端Cys用Cy5.5-Maleimide標(biāo)記其巰基側(cè)鏈。研究結(jié)果表明:上述Cy5.5-cMBP多肽與U87MG腫瘤細(xì)胞共孵24小時后,具有較高的癌細(xì)胞攝取值,其響應(yīng)濃度在納摩爾級別。
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