自從發(fā)現(xiàn)抗菌肽以來(lái),已對(duì)抗菌肽的作用機(jī)理進(jìn)行了大量研究。目前已知的是,抗菌肽是通過(guò)作用于細(xì)菌細(xì)胞膜而起作用的,在此基礎(chǔ)上,提出了多種抗菌肽與細(xì)胞膜作用的模型。但嚴(yán)格地說(shuō),抗菌肽以何種機(jī)制殺死細(xì)菌至今還沒(méi)有*弄清楚。
目前一般認(rèn)為,Cecropin類抗菌肽作用于細(xì)胞膜,在膜上形成跨膜的離子通道,破壞了膜的完整性,造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏,從而殺死細(xì)胞。
對(duì)于抗菌肽破壞膜的完整性,使細(xì)胞內(nèi)外屏障喪失,從而殺死細(xì)菌這一觀點(diǎn)已得到基本統(tǒng)一的認(rèn)識(shí),但對(duì)其具體作用過(guò)程、是否存在特異性的膜受體、有無(wú)其它因子協(xié)同等問(wèn)題尚不十分清楚,存在不同看法。不同抗菌肽的作用機(jī)制可能不一樣,尚有待進(jìn)一步研究
抗菌肽的基因工程
抗菌肽在動(dòng)物體內(nèi)含量極微。從動(dòng)物體內(nèi)提取抗菌肽產(chǎn)量低、費(fèi)時(shí)長(zhǎng)、工藝復(fù)雜、費(fèi)用昂貴,無(wú)法實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),這成為制約抗菌肽進(jìn)入實(shí)際應(yīng)用的大障礙。因此,開(kāi)展抗菌肽基因工程研究具有重要意義。
目前,已進(jìn)入臨床應(yīng)用的基因工程藥物多數(shù)是采用原核表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的,但由于抗菌肽對(duì)細(xì)菌的殺傷作用,不能用原核表達(dá)系統(tǒng)直接表達(dá)具有生物活性的抗菌肽,而如果采用融合蛋白的形式表達(dá),將給表達(dá)產(chǎn)物的后處理帶來(lái)很大麻煩。因此,國(guó)內(nèi)外的研究者多采用真核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行抗菌肽基因工程研究。
近年來(lái),以酵母為基因工程受體菌的研究引起人們的重視,酵母具有比大腸桿菌更完備的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制和對(duì)表達(dá)產(chǎn)物的加工修飾及分泌能力,并且不會(huì)產(chǎn)生內(nèi)毒素,是基因工程中良好的真核基因受體菌。自1978年Hinnen等首先試驗(yàn)酵母轉(zhuǎn)化成功后,已有人干擾素基因、乙型肝炎表面抗原基因、α-淀粉酶基因等數(shù)十種外源基因在酵母中獲得表達(dá)。國(guó)內(nèi)研究者大量研究表明,利用酵母表達(dá)抗菌肽是一條可行的道路,如能在表達(dá)產(chǎn)率上得到進(jìn)一步提高,將為抗菌肽早日進(jìn)入臨床應(yīng)用奠定良好的基礎(chǔ)。
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